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干货:色谱柱常见问题与对策
人阅读 发布时间:2021-12-14 15:28
液相柱的选择
在 GL Sciences 目录中选择液相柱时,要参考填料表面积、孔径、孔容量、碳含量、封端处理等。
这些参数在具体实验中表现为:
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基体硅胶的物理性质(表面积,孔径,孔体积)
保留能力,样品量,化合物分子量范围
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基体硅胶的金属含量
吸附金属配位化合物(峰形)
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碳含量(十八烷基的引入量)
保留能力,样品负载,色谱柱耐久性
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十八烷基的键密度(键模式:表面积与碳含量的关系)
化合物的平面识别能力(分离选择性)
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封端处理(端盖)
吸附酸性/碱性化合物(保留时间延迟,峰形)
❓ 我们总结了一些使用色谱柱时遇到的常见问题与对策。
—峰形拖尾—
解决途径:
1. 确认配管的死体积 →重新接续
2. 取下保护柱再分析 →如果正常的话就是保护柱的问题
3. 清洗柱子(样品吸附柱子)
→如是可逆性吸附,可清洗解决;
→如是不可逆性吸附,需更换新的柱子
4. 检查流通池与进样体积是否匹配→更换成匹配的流通池
5. 检查溶样溶剂与流动相是否一致→将溶样溶剂更换成与流动相一致
6. 缓冲盐的问题→稀释后再分析,如果变正常了就是缓冲作用的问题
7. 样品浓度过高或进样量过大
→稀释后再分析;降低进样量或样品浓度;使用碳含量高的色谱柱。
8. 仪器漏液→检查漏点并修复
—前拖尾—
解决途径:
1. 样品浓度过高或进样量过大
→稀释后再分析;降低进样量或样品浓度;使用碳含量高的色谱柱。
2.柱头堵塞→清洗柱子
—分叉峰—
解决途径:
1. 进样量过大或浓度过大
→稀释后再分析;降低进样量或样品浓度;使用碳含量高的色谱柱。
2. 色谱柱前端污染→清洗色谱柱并使用保护柱
—大肚子峰—
解决途径:
1. 柱头堵塞(大多是因缓冲液结晶所至)→清洗柱子
对策升级⭐液相柱维护保养工具
✔样品前处理——针式过滤器(上海正晃独/家代理)
目的:除去样品中的微小颗粒,避免堵塞色谱柱,尤其是使用无机盐配制的缓冲液。
✔使用预洁净柱,去除溶剂中(特别是水)的杂质
在泵和进样器之间安装,对从泵里出来的垃圾或者杂质进行过滤。柱芯模式,更换简便。
✔使用保护柱
反相分析时能去除样品中高脂溶性不纯物;
正相分析时能去除样品中高极性不纯物;
以及去除样品或溶液中的不溶物、泵处带出的杂质。
✔反相柱的清洗
**洗浄时流速为分析时的流速或者一半流速为基准(例:内径 4.6 mm 柱子洗浄时的流速以 0.5~1.0 mL/min 为基准)。请在说明书的可使用范围内洗净。
气相色谱柱的选择
在 GL Sciences 目录中选择气相柱时,要考虑液相种类(固定相组成)、色谱柱长度、内径、固定相膜厚等。
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固定相组成不同,极性也不一样
选择时要考虑沸点
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色谱柱长度增加一倍,分析时间多一倍
在分析允许的范围内,尽量选择短柱
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内径越细,峰形越密
重视分离 0.18 mm~0.25 mm
一般分析 0.25 mm~0.32 mm
大量进样 0.53 mm
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固定相膜厚
膜厚增加,分离度更高,而峰高减少!
要增加样品负载量,选择膜厚的柱子;
分析低沸点成分时,要用膜厚的柱子;
分析高沸点成分时,要用膜薄的柱子。
❓使用时遇到的常见问题
—峰形异常—
拖尾峰
分叉峰
—保留时间变动—
—重现性不好—
—鬼峰—
气相柱日常管理要点
色谱柱安装
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为了防止污染,厂家在出厂的色谱柱的两端进行了封口。请使用色谱柱切割器,在两端分别垂直切除柱子约 2 cm。切割时,请注意不要因切割碎片受伤。
陶瓷质色谱柱切割器ーCat.No.1010-41100
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请定好色谱柱进样口处和检测器连接处长度。
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使用与色谱柱外径吻合的压环安装色谱柱。色谱柱穿通压环后,请务必将色谱柱前端切除约 1 cm。
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请使用测漏仪(LD239)、皂沫(泄漏检查液),确认有否泄漏。
防止色谱柱劣化
温度:不要将温度升至不必要的高度。
氧气:使用高纯度载气。使用氧阱。使用前充分通载气。
水:在高温度下,勿流入大量的水。
样品:勿将不挥发性样品注入色谱柱。使用保护柱。
色谱柱保管
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惰性气体吹扫
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两端密封
石英硅胶封口Cat.No.1010-41140(红)41141(绿)41142(蓝)
更多对策⭐ InertCap ProGuard
✔保护柱一体型色谱柱,避免受样品中杂质污染,提高气相色谱柱的使用寿命。
✔传输口一体型色谱柱,减少柱流失。
✔气体检漏仪器 LD239
✔流量计 GF 1010
● 气体供应不稳定时使用 ● 测试实际色谱柱流量
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